BIOPHYTIS : Infos technique 2

Jato_makoto

14 juil. 2021 •16:18

3. Activité biologique de BIO101 et BIO103
Si les effets anabolisants de la 20E présente dans des préparations commerciales ont déjà été démontrés chez des animaux jeunes, on ne connaît pas l'effet de la 20E dans un contexte de mammifère atteint de myopathie dans laquelle l'installation progressive d'une fibrose contribue à l'altération de la fonction musculaire. Le modèle animal de la myopathie de Duchenne employant des souris mdx, de fond génétique C57BL10, qui présentent une mutation sur le gène de la dystrophine, a été mis en œuvre (Bulfield et al. 1984 ; Sicinski et al. 1989).
Des souris mâles de fond génétique C57BL10 (souris sauvages dénommées « C57 » dans les figures) et C57BL10 mdx (modèle murin de la dystrophie musculaire de Duchenne, dénommées « mdx » dans les figures) de douze semaines, produites chez Charles Rivers, ont été utilisées. Deux groupes des souris mdx ont été exposés par voie orale de manière chronique soit à BIO101 (nombre de souris n=9) soit à BIO103 (nombre de souris n=9) à la dose de 50 mg/kg*jour. Un groupe de souris C57 (nombre de souris n=5) et un groupe des souris mdx (nombre de souris n=15) ont reçu le véhicule, soit aucun traitement. Les animaux de tous les groupes ont été testés pour leur capacité fonctionnelle (test de tolérance à l'effort) après deux mois de traitement. Le test de tolérance à l'effort consiste à mesurer la distance maximale parcourue (activité in toto ; Figures 1 A et 1 B). En outre, des mesures de la force maximale isométrique absolue du muscle tibial antérieur (activité in situ ; Figures 2A et 2B) ont été effectuées après deux mois de traitement.
Le traitement par voie orale sur deux mois consiste au gavage pendant cinq jours par semaine et dans l'eau de boisson deux jours par semaine.
Test de tolérance à l'effort (étude fonctionnelle in toto : figures 1 A et 1 B)
Le test de tolérance à l'effort est un exercice forcé sur tapis roulant motorisé. C'est une méthode non invasive pour évaluer la fonction du muscle squelettique in toto. C'est la méthode de référence dans le domaine (Ferry et al. 1992, 1993 ; Hadj- Said et al. 2012).
La durée d'acclimatation des animaux est au moins de 48h avant la séance durant laquelle est mesurée la distance maximale de course. Durant le test, la souris est placée dans un couloir de course sur un tapis roulant motorisé qui permet de faire un exercice contrôlé par l'expérimentateur dans son intensité et sa durée. Le tapis roulant se termine par une grille horizontale qui administre un choc électrique (0,4 mA) si l'animal est en contact plus d'une seconde avec la grille.
La séance de course débute par une période d'échauffement de 2 minutes pendant laquelle la vitesse est amenée de 0 à 20 cm/s. Par la suite, la vitesse de course est augmentée de 5 cm/s toutes les 10 minutes jusqu'à la limite des capacités maximales de la souris. Lorsqu'elle subit 5 chocs en moins de 10 secondes, le test s'arrête. La distance parcourue est notée.
De manière attendue, il est constaté que les animaux qui présentent une mutation sur le gène de la dystrophine (mdx) courent significativement moins (- 80,4%, p